麒麟丸由制何首烏、墨旱蓮、淫羊藿、菟絲子、鎖陽、 黨參、郁金、枸杞子、覆盆子、山藥、丹參、黃芪、白 芍、青皮、桑椹等 15 味中藥組成，能夠補腎填精，益氣 養血。適用于腎虛精虧，血氣不足，腰膝酸軟，倦怠乏 力，面色不華，男子精液清稀，陽痿早泄，女子月經不 調，或男子不育癥，女子不孕癥見有上述證候者。目前， 該質量標準設立了制何首烏中大黃素含量的薄層色譜掃 描法作為含量測定項，文獻中也僅有報道制何首烏中二 苯乙烯苷的含量測定方法 ，對該組方中其它成分的含 量測定方法未見報道。該方中青皮具有疏肝理氣、消積化滯的功效，其主要活性成分為黃酮類成分，現代藥理 學研究表明橙皮苷具有抗氧化和延緩衰老的作用；丹 參具有活血化瘀，通經止痛的功效，用于胸痹心痛，癥 瘕積聚，月經不調等。其主要活性成分為丹參酮和丹酚 酸類組分。其中丹酚酸 B 具有抗氧化、防治動脈粥樣硬 化等作用；淫羊藿具有補腎陽，強筋骨的功效，用于 腎陽虛衰，陽痿遺精，筋骨痿軟 ；淫羊藿總黃酮為其主 要活性成分，其中淫羊藿苷具有增強免疫力，抗氧化和 抗衰老的藥理作用。因此，本實驗選擇橙皮苷、丹 酚酸 B 和淫羊藿苷為指標成分，建立 HPLC 方法同時測 定上述 3 種成分的含量，為其質量控制提供依據。

Agilent 1260高效液相色譜儀（美國 Agilent 公司）；HZQ-50H 加熱回旋振蕩器（上海一恒科學儀器有限公 司）；KQ-500DE 超聲波清洗器（昆山超聲儀器有限公 司）；5810R 離心機（德國 Eppendorf 公司）。

橙皮苷購自百靈威科技（ 批號L190Q57，純度 98.1%）；丹酚酸B購自成都普瑞法科技開發有限公司（批號 PRF7060803，純度 98.3%）；淫羊藿苷購自南京景竹生物科技有限公司（批號 JZ16121109，純度 98.7%）；麒麟丸來自廣東太安堂藥業股份有限公司（批 號 A20161101、B20180807 和 B20180809，60 g/ 瓶）；乙腈、三氟乙酸為色譜純 ；其他試劑均為分析純 ；水為純凈水。

取麒麟丸適量研細，精密稱取 2 g，至 100 ml 具塞 錐形瓶中，加入 50% 乙醇溶液 50 ml，稱定重量，37 ℃ 振搖 30 min，再超聲 30 min，用 50% 乙醇補足減失的重 量，搖勻，過 0.45 mm 聚四氟乙烯濾膜，取續濾液，即得。

取橙皮苷對照品 30 mg，精密稱定，置 100 ml 量瓶 中，精密加入 1 ml 二甲基亞砜使溶解，然后加入 50% 乙醇溶液稀釋并定容至刻度，搖勻，作為橙皮苷的對照 品溶液 ；稱取 16 mg 丹酚酸 B，置于 100 ml 量瓶中，加 入 50% 乙醇稀釋并定容至刻度，搖勻，作為丹酚酸 B 的 對照品溶液 ；精密稱取 10 mg 淫羊藿苷，置于 100 ml 量 瓶中，加入 50% 乙醇稀釋并定容至刻度，作為淫羊藿苷 的對照品溶液 ；精密吸取上述各對照品溶液各 5 ml 置于 100 ml 量瓶中，加 50% 乙醇定容至刻度，搖勻，制成每 1 ml 含橙皮苷 15 mg、丹酚酸 B 8 mg、淫羊藿苷 5 mg 的 混合對照品溶液 ；精密吸取 2、3、4、5 和 6 ml 至 10 ml 量瓶中，加 50% 乙醇定容至刻度，即得系列濃度的混合 對照品溶液。

色譜柱為 Vensuil XBP C18（4.6 mm×250 mm，5 mm）；流動相 A 為含 0.05% 三氟乙酸的水溶液、B 為 含 0.05% 三氟乙酸的乙腈溶液，梯度洗脫（0 ～ 48 min， 90%A→70%A ；48 ～ 55 min，70%A→5%A）；體積流量 1.2 ml/min ；柱溫 30 ℃ ；檢測波長 220 nm ；進樣量 10 ml。

將對照品和供試品溶液分別進樣測試，理論塔板數 均 >5 000，各峰與相鄰峰的分離度 >1.5（圖 1）。

2.2 線性關系考察

以峰面積為縱坐標（Y）、質量濃度（mg/ml）為橫 坐標（X），繪制標準曲線，各成分在各自濃度范圍內線 性關系良好（表 1）。

2.3 精密度試驗

同一供試品溶液連續進樣 6 次進行測定，計算橙皮 苷、丹酚酸 B 和淫羊藿苷色譜峰的峰面積，RSD 分別為 0.8%、1.5% 和 1.1%，表明儀器的精密度良好。 2.4 重復性試驗 精密稱取同一供試品（批號 A20161101）粉末 2.0 g， 共 6 份，按“1.3.1”項下方法制備供試品溶液，HPLC測定并計算得橙皮苷、丹酚酸 B、淫羊藿苷的 RSD 分別 為 0.8%、1.5%、1.1%，表明該方法重復性良好。 2.5 穩定性試驗 取供試品溶液于 0、20、50、90 h 進樣測定，測得 橙皮苷、丹酚酸 B、淫羊藿苷峰面積 RSD 分別為 0.6%、 1.2%、0.7%，說明供試品溶液在 90 h 內穩定性良好。

流動相曾選擇考察了乙腈 - 磷酸、乙腈 - 醋酸 - 醋 酸銨、乙腈 - 三氟乙酸和不同梯度下的洗脫情況，發現 在乙腈 -0.05% 三氟乙酸條件下洗脫色譜峰峰型和分離效 果均比較好，因此選擇乙腈 -0.05% 三氟乙酸作為流動相。 采用二極管陣列檢測器，在 200 ～ 400 nm 范圍內 進行光譜掃描，發現橙皮苷、丹酚酸 B 和淫羊藿苷的最 大波長分別為 282 nm、286 nm、270 nm，此外，3 種成 分在波長 220 nm 和 230 nm 均有明顯的吸收，因此，分 別對220 nm、230 nm和270 nm波長下的色譜峰進行分析， 發現 220 nm 波長下各成分的響應值最大，且分離度良好，因此，選擇 220 nm 作為檢測波長。