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KQ-300DV用于鹽酸林可霉素注射液的分析改進

返回列表 來源:未知 發布日期:2019-08-23 09:06【

鹽酸林可霉素又稱鹽酸潔霉素,鹽酸林可霉素注射液 屬于人畜共用藥,主要用于治療革蘭陽性菌和支原體感染。 對葡萄球菌、溶血性鏈球菌抑制作用較強,對厭氧菌如破 傷風梭菌、產氣莢膜芽孢桿菌有抑制作用,對豬痢疾密螺 旋體和弓形蟲也有一定作用。主要作用于細菌核糖體的 50 s 亞基,抑制肽鏈延長,干擾細菌蛋白質合成,屬生長 期抑菌劑。鹽酸林可霉素在治療各種感染中得到廣泛應 用,因此,建立鹽酸林可霉素快速而有效的含量檢測方法 尤為重要。目前,鹽酸林可霉素的含量測定方法有色譜法、 質譜法、光譜法。色譜法中流動相幾乎都用到鹽溶液, 但質譜法所用儀器昂貴,不利于產品質量控制的推廣。



1 儀器與材料

1.1 儀器


U3000 戴安高效液相色譜儀,配戴安二極管陣列檢測 器,美國熱電公司;XS105DU 型分析天平 (瑞士 Mettler Toledo 公司);FE20 型 pH 計 (瑞士 Mettler Toledo 公司); KQ-300DV 型數控超聲波清洗器(昆山市超聲儀器有限公 司)。



1.2 試藥與試劑

1.2.1 試劑


甲醇、乙腈均為色譜純,美國 Merck 產品;氨 水、磷酸為分析純,購自國藥集團化學試劑北京有限公司; 實驗用水為 milli-Q 超純水。



1.2.2 對照品

鹽酸林可霉素對照品(中國食品藥品檢定 研究院,批號:130432-201109,含量:85.7%)。



1.2.3 供試品

鹽酸林可霉素注射液供試品 A (規格 10∶ 0.6,mL/g)由標稱安徽省某企業生產;鹽酸林可霉素注射 液供試品 B、鹽酸林可霉素注射液供試品 C (規格 10∶1, mL/g),由標稱河北省某企業生產;鹽酸林可霉素注射液供 試品 D(規格 10∶0.6,mL/g)由標稱山東省某企業生產。



2 方法與結果

2.1 色譜條件


色譜柱:Waters XSelect CSH C18(4.6 mm×250 mm,5 μm); 流動相:以磷酸溶液[取磷酸 13.5 mL,加水至 1 000 mL, 用氨水調節 pH 值至(6.0±0.1)]-乙腈-甲醇(80∶15∶15);流 速:1.0 mL/min;柱溫:40 ℃;二極管陣列檢測器;掃描波 長:190~400 nm;分辨率 1.2 nm;記錄 210 nm 的色譜圖; 進樣量:10 μL。



2.2 溶液的制備

2.2.1 對照品儲備液及系統適用性溶液的制備


精密稱 取鹽酸林可霉素對照品 250.25 mg,置 25 mL 量瓶中,加流動相稀釋并定容至刻度,作為對照品儲備液(含林可霉素 約 10 mg/mL)。精密量取適量,用流動相稀釋成 2 mg/mL 的系統適用性溶液。 2.2.2 供試品溶液制備 精密量取供試品適量 (約相當 于林可霉素 100 mg),置 50 mL 量瓶中,用流動相稀釋并 定容至刻度,即得。



2.3 方法學考察

2.3.1 專屬性及系統適用性試驗


林可霉素在“2.1”色譜 條件下,取系統適用性溶液 10 μL,注入高效液相色譜儀, 記錄色譜圖及光譜圖。結果表明,林可霉素 B 與林可霉素 完全分離,分離度大于 2.1,林可霉素色譜峰理論塔板數 大于 7 000,表明方法專屬性良好,說明所選的試驗條件 滿足測定要求。系統適應性溶液色譜圖及相應對照品光譜。



2.3.2 線性

精密量取對照品儲備液適量,用流動相稀釋 成 0.1 mg/mL、0.5 mg/mL、1.0 mg/mL、1.5 mg/mL、2.0 mg/mL、 4.0 mg /mL 的標準曲線溶液,照“2.1”項下的色譜條件測 定。按峰面積與對應的濃度作標準曲線,并計算回歸方程 和相關系數。回歸方程及相關系數分別為:Y=7.240 2X2.238 3,R=0.999 9。結果表明,林可霉素在 0.1~4.0 mg/mL 濃度范圍內,濃度與峰面積呈現良好的線性關系。



2.3.3 精 密 度 試 驗

精 密 吸 取 對 照 品 溶 液 10 μL,在 “2.1”項下的色譜條件,連續重復進樣 6 次,記錄峰面積,6 次林可霉素峰面積的 RSD 為 0.1%,表明儀器精密度良好。



3 結論

3.1 檢測波長的選擇 由于林可霉素、林可霉素 B 為末端吸收,在林可霉素 的光譜圖中顯示最大吸收峰 196.5 nm,但是考慮到流動相 中甲醇、乙腈在紫外末端的影響,所以選定在較高靈敏度 的 210 作為檢測波長。本液相方法與《中華人民共和國獸 藥典》2015 年版一部的液相色譜方法進行比較,兩者在測 定樣品中林可霉素含量時,測定結果基本一致(P>0.05)。



3.2 本方法具有減少鹽溶液對色譜系統的污染、提高色 譜系統的穩定性、同時簡便、準確、重現性好、專屬性強, 能夠有效的控制該產品的質量,為產品標準改進提供了研究基礎。



 


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