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檳榔含有多種人體所需的營養物質和微量元素， 如脂肪、檳榔油、生物堿等成分，其性味苦、辛、 溫，具有殺蟲、消積等功能，可藥用也可食用。在 我國，檳榔擁有巨大的市場，僅湖南地區產值就已 達到 40 億 ~ 50 億元。消費者對檳榔的口感、口味 有一定要求，甜度是影響檳榔口感的重要指標之一。 甜蜜素 （C6H11NH）2 化學名稱為環己基氨基磺酸鈉， 是一種人工合成的非營養型低熱能甜味劑，其甜度 為蔗糖的 30~50 倍，且價格低廉、后苦味小，因此 被廣泛用于食品加工、農業等領域。但有研究表 明甜蜜素不被人體吸收而且會加重人體肝臟負擔，對腎臟有毒副作用，并具有潛在致癌性，因此在 實際過程中要嚴格把控甜蜜素的添加量。國家制定 相關的甜蜜素檢測標準 （GB/T 5009.97—2003），該 標準中甜蜜素的檢測方法包含填充柱氣相色譜法、 比色法、薄層層析法。氣相色譜法測定甜蜜素時 通常以環己醇亞硝酸脂作為定量依據，但甜蜜素 和亞硝酸鈉在硫酸存在時會生成環己醇，環己醇可 與亞硝酸鈉發生酯化反應生成環己醇亞硝酸酯，此 反應為可逆反應，環己醇不能完全轉換為環己醇亞 硝酸酯，而 2 種產物之間的峰面積之和一定，因此 可以通過 2 種產物的峰面積之和進行定量分析。
通過峰面積加和的定量方法并結合超聲提取， 建立了從檳榔中檢測甜蜜素的方法，并通過正交試 驗篩選出最佳提取工藝，該方法準確度高，精密度、 分離度良好，可以滿足檳榔中的甜蜜素檢測。
甜蜜素 （標準品純度≥98%），上海源葉生物科技有限公司提供；正己烷、氯化鈉、亞硝酸鈉溶液、 硫酸溶液。以上試劑均為分析純。
Agilent GC7890B 型氣相色譜，配FID檢測器， 美國安捷倫公司產品；SHZ- 82 型恒溫水浴振蕩器， 常州市中貝儀器有限公司產品；AR224CN 型分析天 平，奧豪斯儀器有限公司產品；ZWSH- 250 型超純 水機，湖南中沃水務環?？萍加邢薰井a品；KQ700E 型超聲波清洗機，昆山舒美超聲儀器有限公司 產品。
色譜柱：HP- 5 石英毛細管柱 （30 m×0.32 mm× 0.25 μm）；進樣口：加熱器溫度 220 ℃，進樣量 1 μL，分流比 5∶1；載氣 N2，流量 40 mL/min；柱 箱溫度：恒溫 70 ℃；FID 檢測器：溫度 250 ℃，氫 氣流量 47 mL/min，空氣流量 400 mL/min，氮氣流量 30 mL/min。
選取 5 顆大小、形狀、紋路近似的檳榔，切碎 混勻，取 2~3 g 樣品置于 50 mL 錐形瓶中，以超純 水為提取溶劑，采用超聲的方法提取檳榔中甜蜜素， 樣品經超聲提取后冷卻至室溫，取 1 mL 提取液置于 100 mL具塞比色管中，依次加入 15 mL超純水、5 mL 50 g/L亞硝酸鈉溶液和 100 g/L硫酸溶液，冰浴，以轉 速 80 r/min 振搖 30 min 后，加入 5 g 氯化鈉，10 mL 正己烷，振搖 100 次，靜置分層，取上層正己烷適 量注入氣相色譜儀中進行測定，每個樣品平行 3 份。
稱取檳榔碎塊 9 份，每份 2.0 g，采用 L（9 34 ）正交 試驗表進行試驗設計，結合單因素試驗結果，以甜蜜 素提取率為指標，考查料液比 （A）、提取溫度 （B）、 超聲時間 （C） 3 個因素對甜蜜素提取率的影響。 正交提取試驗因素與水平設計見表 1。
超聲時間對甜蜜素提取率的影響見圖 1。
由圖 1 可知，隨著超聲時間的延長，甜蜜素提 取率逐漸升高，但在 60 min 后甜蜜素提取率隨著超 聲時間的延長而降低，這可能是因為超聲波作用時 間過長破壞了甜蜜素分子結構所致。因此選取超聲 時間 45，60，75 min 3 個水平進行正交試驗。
提取溫度對甜蜜素提取率的影響見圖 2。
高，甜蜜素提取率越高。提取溫度高于 70 ℃后， 甜蜜素提取率下降。造成這種現象的原因可能是在 低溫時，隨著溫度的升高，分子運動加快，使得甜 蜜素從檳榔中充分釋放；當溫度高于 70 ℃后，超聲 波與高溫的協同作用使得甜蜜素分子破壞降解，導 致提取所得甜蜜素含量降低。因此選取提取溫度 50， 60，70 ℃ 3 個水平進行正交試驗。
料液比對甜蜜素提取率的影響見圖 3。 由圖 3 可知，對比料液比 1∶5 與 1∶10，前者 的甜蜜素提取率遠低于后者，料液比在 1∶10 后，甜 蜜素提取率幾乎沒有變化?？梢耘袛嗔弦罕?1∶10 可 溶解檳榔中大部分甜蜜素，所以繼續增大料液比對甜蜜素含量幾乎沒有變化。因此，綜合考慮選用料液比 1∶10，1∶15，1∶20 3 個水平進行正交試驗。
采用超聲提取 / 氣相色譜法測定檳榔中甜蜜素的 含量，利用單因素試驗和正交試驗確定了最佳提取 工藝為提取溫度 60 ℃，超聲時間 30 min，料液比 1∶15 （mg∶mL）。同時，使用 HP- 5 毛細管柱管對 樣品中的甜蜜素進行了分離，用組校準的方法對樣 品進行了定量分析。測定檳榔中甜蜜素的方法，檢測 結果準確、甜蜜素峰形好、線性范圍廣、良好的準確 度和精確度，重復性、再現性好，可以滿足檳榔中甜 蜜素含量的檢測，在檳榔行業中具有推廣意義。
