八月瓜(Akebia trifoliate(Thunb.)Koidz.)為木通 科木通屬落葉藤本植物,其果實又稱木通子、八月扎、 八月炸、預知子等,是一種集藥用、食用于一身的野生 經濟植物,分布于我國南部、長江流域和西北地區。 八月瓜果實、葉、種子和根中富含糖、維生素、礦物質、 有機酸、氨基酸、油脂、木質素、多酚、黃酮及抗衰老等 成分,可鮮食,也可釀酒、制醋、加工成果脯等食品。 民間多用于治療小便赤澀、淋濁水腫、胸中煩熱、喉痹 咽痛、遍身拘痛、婦女經閉、乳汁不通等疾病。
八月瓜葉和果實采自貴州省遵義縣沙灣鎮八一 村,經貴陽學院副教授楊碧仙鑒定為木通科木通屬植 物三葉木通 Akebia trifoliate(Thunb.)Koidz.的葉和果實,將八月瓜貯藏于 4 ℃采樣箱運回貴州省果品加工工程技術研究中心實驗室,果肉和果皮分離,果肉去 籽后,-80 ℃超低溫冰箱保存備用。 沒食子酸、兒茶素、綠原酸、表兒茶素、p-香豆酸、 阿魏酸、鞣花酸、蘆丁和槲皮素(9 種酚類分析標準品,純 度≥95.0 %)、甲醇、三氟乙酸(色譜純,純度≥99.5 %): 上海阿拉丁生化科技股份有限公司;抗壞血酸、三氯 乙酸(trichloroacetic acid,TCA)分析純、福林酚(FolinCiocalteu)試劑:上海聚源生物科技有限公司;Trolox 試 劑、三吡啶三吖嗪 (tripyridyltriazine,TPTZ)、2,2-聯 氮-二(3-乙基-苯并噻唑-6-磺酸)二銨鹽 [2,2-azinobis(3-ethyl-benzothiazoline-6-sulfonic acid)diammoni- um salt,ABTS]:美國 Sigma 公司。其他試劑均為國產分 析純。
LC-20A 高效液相色譜儀、UV-2550 型紫外分光 光度計:日本島津公司;KQ5200DE 超聲清洗器:昆山市超聲儀器有限公司;IKA A11 研磨機:IKA 公司 (德 國);C18 色譜柱 (250 mm×4.6 mm,5 μm):Waters 公司 (中國上海)。
稱取 10 g 樣品研磨成漿,取 2 g 果漿于 10 mL 離 心管中,加入 4.0 mL 70 % 甲醇溶液,50 ℃超聲波輔助 提取 30 min,冷卻后 10 000 r/min 離心 15 min,將上清 液過濾到 10 mL 的容量瓶中,加入 3.0 mL 70 %甲醇溶 液于殘渣中再提取 30 min,在 4 ℃、12 000 r/min 離心 10 min,合并上清液,用 70 %甲醇溶液定容,用 0.45 μm 的濾膜過濾后待測,取 1.0 mL 轉移至進樣瓶中等待進 樣,每個樣品 3 次重復。
準確稱取 9 種酚類物質標準品各 10.00 mg,用甲 醇溶解并定容至 10.0 mL,配制成 1.00 mg/mL 的酚類物質標準品貯備液,保存于-4 ℃冰箱備用。
9 種多酚化合 物的標準品得到了較好的分離 (圖 1A),野生八月瓜 葉、果皮和果肉樣品溶液色譜圖(圖 B、C、D)中的 9 個 目標峰,其保留時間與標準品溶液的 9 個色譜峰保留 時間一致。在此色譜條件下,八月瓜葉、果皮和果肉中 的酚類成分得到較好的分離。八月瓜葉、果皮和果肉中各成分含量差 異顯著 (P<0.05),各部位活性成分含量大小順序為: 葉>果皮>果肉,其中葉中沒食子酸、兒茶素、p-香豆 酸、阿魏酸、鞣花酸、蘆丁、槲皮素、抗壞血酸和總酚含 量相對較高,其中沒食子酸含量 ([ 715.64±4.69)μg/g Fw]是果皮、果肉的 6 倍和 12 倍;兒茶素含量([ 9.16± 0.41)μg/g Fw]是果皮、果肉的 3 倍和 17 倍;p-香豆酸 含量([ 0.6±0.06)μg/g Fw]是果皮的 7.5 倍,果肉中未檢 測到;阿魏酸含量([ 7.88±0.43)μg/g Fw]是果皮、果肉的 1.3 倍和 88 倍;鞣花酸含量([ 147.61±0.87)μg/g Fw]是 果皮、果肉的 12 倍和 9 倍;蘆丁在葉中含量([ 50.24± 1.53)μg/g Fw]是果皮和果肉的 10 倍,蘆丁在果肉和果 皮中的含量差異不顯著(P>0.05);槲皮素含量([ 27.36± 0.77)μg/g Fw]是果皮、果肉的 6 倍和 9 倍;抗壞血酸含 量([ 200.12±0.23)mg/100 g FW]是果皮、果肉的 7 倍和 81 倍;總酚([ 3.44±0.11)mg/g FW]含量是果皮、果肉的 1.3 倍和 43 倍。而果皮中綠原酸和表兒茶素含量相對 較高,其中綠原酸含量([ 52.82±0.71)μg/g Fw]是葉、果 肉 1.2 倍和 123 倍;表兒茶素含量 ([ 1.08±0.10)μg/g Fw]是葉、果肉 3 倍和 18 倍。八月瓜葉和果皮中總黃酮 含量差異不顯著(P>0.05),葉和果皮中總黃酮含量是 果肉([ 0.19±0.00)μg/g Fw]的 24 倍。綜上所述,八月瓜 除了可食用部分果肉,其葉和莖均含有較高的活性物 質且不同部位間存在顯著差異。
邵顯會分析了三葉木通不同部位總黃酮含量,發 現黃酮含量從高到低依次是根(5.72 %)>葉(4.5 %)>果 皮(2.0 %)>果肉(0.2 %),張孟琴等分析了三葉木通 果皮黃酮含量(2.32 %),本研究發現不同部位黃酮含 量的總體趨勢和邵顯會等研究一致,但含量顯著低于 邵顯會和張孟琴等報道,且總黃酮在果皮和葉中含量 差異不顯著;歐陽玉祝等用離子沉淀法分離了果皮 中總多酚,總多酚提取率為 5.103 7 %,顧仁勇等響應 面優化超臨界 CO2 萃取八月瓜幼果多酚,八月瓜幼果 多酚萃取得率可達 6.41 %,本研究發現八月瓜不同部 位多酚含量的總體趨勢與陸俊等的研究一致,但含量 顯著低于文獻報道,發現 VC、黃 酮含量、總酚含量和個別酚類成分與抗氧化能力間有 顯著相關性,因此八月瓜不同部位的抗氧化能力不 一,且葉和果皮的抗氧化能力顯著高于果肉,可考慮 作為天然抗氧化劑,用于美容護膚品、植物酚類保健 品或者防止心腦血管疾病藥物的開發。