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化學成分含量的相關性研討

返回列表 來源:未知 發布日期:2019-08-09 09:42【

附子為毛茛科植物烏頭 Aconitum carmichaelii Debx. 的子根的加工品 。在我國傳統醫學中應用歷 史悠久,被稱為“回陽救逆第一品”。《中華人民共和 國藥典》2015 年版一部中附子以苯甲酰新烏頭原堿 (C31H43NO10)、苯甲酰烏頭原堿(C32H45NO10)和苯甲酰 次烏頭原堿(C31H43NO9)這 3 個單酯型生物堿的總量 作為質量控制指標,含量的高低可以反映附子的內在質 量。附子不同的性狀中,黑順片為外皮黑褐色、切面暗 黃色,白附片為黃白色。那么,這種基于有效成分含量 的質量評價與傳統的外觀色澤之間是否具有相關性,或 者說,能否采用色澤的測定進行附子質量的評價,起到 更加便捷、快速、經濟的效果,是人們關心的問題。



1 儀器與試藥

NH310 型 高 品 質 便 攜 式 電 腦 色 差 儀[光 源: D65(代表自然日光,6504 K),CIE(國際照明委員 會)認可,深圳市三恩馳科技有限公司];DFT-50A 型手提式高速粉碎機(溫嶺市林大機械有限公司); LC-20AT 型 高 效 液 相 色 譜 儀,SPD-M20A 型二極 管陣列檢測器(島津公司);電子分析天平(XS105 DualRange-0.000 01 g,Ohaus CP224C-0.000 1 g); KQ-100E 型超聲波清洗器(100 W,昆山市超聲儀器有限公司);DHG-9063A 型電熱鼓風干燥箱(上海一恒科學儀器有限公司);RV10DS77 型旋轉蒸發儀 (Ika 儀器設備有限公司)。



2 方法與結果

2.1 附子粉末的色澤測定


色差儀利用的 CIE LAB 色度空間為 1976 年 CIE 推薦的均勻顏色空間,1987 年我國發布 GB7921-87, 將 LAB 空間作為國家標準。CIE LAB 是利用△L、 △a、△b 3 個坐標軸,指示顏色在幾何空間中的位 置 。△L 表示明度,數值越大越感覺白,越小越 感覺黑;△a 表示紅色到綠色,數值越大越感覺紅,越 小越感覺綠;△b 表示從黃色到藍色,數值越大越感 覺黃,越小越感覺藍。 首先進行黑白校正,然后以白色 A 4 打印紙作 為標準測定 L* 標、a* 標、b* 標,再取附子樣品粉末(過 3 號篩)約 3 g 置于樣品皿中,測定 L* 樣、a* 樣、b* 樣, 計算△L=L* 樣 -L* 標,△a=a* 樣 -a* 標,△b=b* 樣 -b* 標, △E=(△L2 + △a2 + △b 2 )1/2,結果見表 2。 2.2 3 種單酯型生物堿的含量測定 2.2.1  色 譜 條 件  采 用 Diamonsil Plus C18 色譜柱 (150 mm×4.6 mm,5 μm),流動相 A 為乙腈 - 四氫呋 喃(25 ∶ 15),流動相 B 為每 1 000 mL 加冰醋酸 0.5 mL 的 0.1 mol·L-1 醋酸銨溶液,梯度洗脫(0~48 min, 12%A → 22%A;48~50 min,22%A → 35%A),流 速 1.0 mL·min-1,檢測波長 235 nm,柱溫 30 ℃,進樣量 10 μL。



3 討論

在 D65 光源下色度值△L 介 于 -34.38~-14.76,平 均 值 為 -23.06;△a 介 于 2.54~5.22,平 均 值 為 3.43;△b 介 于 10.94~16.34, 平均值為 12.81;△E 介 于 20.13~37.05,平 均 值 為 26.80。應用 SPSS 分析軟件。L 與苯甲酰新烏頭 原堿、苯甲酰烏頭原堿、苯甲酰次烏頭原堿的含量及 3 個單酯型生物堿的總含量呈負相關,與 5-HMF 的 含量呈正相關;△a 與苯甲酰新烏頭原堿及 5-HMF 的含量呈負相關,與苯甲酰烏頭原堿、苯甲酰次烏頭 原堿及 3 個單酯型生物堿的總含量呈正相關;△b 與 苯甲酰新烏頭原堿、苯甲酰烏頭原堿和 5-HMF 的 含量、3 個單酯型生物堿的總含量均呈負相關,與 苯甲酰次烏頭原堿的含量呈正相關;△E 與苯甲酰新烏頭原堿、苯甲酰烏頭原堿的含量呈顯著正相關 (P<0.05),與苯甲酰次烏頭原堿及 3 個單酯型生物堿 的總含量呈極顯著正相關(P<0.01),與 5-HMF 的含 量呈負相關。


5-HMF 是麥拉德(Maillard)反應的產物之一, 目前,包括 5-HMF 在內的 Maillard 反應產物的藥理 和毒理作用存在較多爭議,加之附子本身為毒性中 藥,因此控制其 5-HMF 的含量有重要意義。 本研究采用色差儀對附子進行色澤的客觀量化, 實現了附子的傳統性狀描寫從主觀經驗向客觀量化 的轉變;在現有研究基礎上優化了 5-HMF 的 HPLC 含量測定方法 ,進行了方法學的驗證,并進行了 附子中 5-HMF 的 HPLC 含量測定;進行色澤量化指 標與 3 個單酯型生物堿含量及其總含量、5-HMF 含 量的相關性分析,發現了它們之間的對應關系,對于 全面評價附子的質量提供了科學的依據。

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