昆山舒美介紹了梨中可溶性糖的組成和含量對(duì)梨果實(shí)的營(yíng)養(yǎng)品質(zhì) 和感官品質(zhì)有重要影響。不同品種梨由于生長(zhǎng)環(huán)境、 種屬類別等因素的影響,糖組分也會(huì)有很大差異。 本文以黃金梨、皇冠梨、雪花梨為研究對(duì)象,對(duì)其中 的果糖、葡萄糖、蔗糖含量進(jìn)行對(duì)比。對(duì)糖的傳統(tǒng)測(cè)定方法主要有: 化學(xué)滴定法,分光光度法,高效液相-示差折光法。化學(xué)滴定法 對(duì)試劑、操作過(guò)程要求嚴(yán)格且步驟多、操作復(fù)雜、費(fèi) 時(shí),滴定終點(diǎn)受實(shí)驗(yàn)條件影響較大。分光光度法準(zhǔn)確 度高,操作簡(jiǎn)便、快速,但只能測(cè)定糖的總含量, 不能確定糖分的組成。
黃金梨 ( 新疆產(chǎn)) 、黃冠梨 ( 河北產(chǎn)) 、雪花梨 ( 河北產(chǎn)) 均購(gòu)于長(zhǎng)春市共和果品超市; 果糖、葡萄 糖和蔗糖購(gòu)自上海國(guó)藥化學(xué)試劑公司,甲醇為色譜純 試劑,購(gòu)自美國(guó)熱電飛世爾科學(xué)有限公司; 二次蒸餾 水為自制; 其他均為國(guó)產(chǎn)分析純?cè)噭?/span>
分別稱取 1. 25g 果糖、葡萄糖、和蔗糖對(duì)照品, 置于 50mL 容量瓶中,用蒸餾水定容至刻度線,搖勻。 以 0. 45μm 孔徑的微孔濾膜過(guò)濾 ( 聚醚砜,MEMBRANA 公司) ,吸取 20μL 濾液用于高效液相色譜分析。
分別精密稱取果糖、葡萄糖、蔗糖對(duì)照品 1. 00g, 置于 3 個(gè) 50mL 容量瓶中,蒸餾水定容至刻度線,搖 勻。作為母液備用。 將果 糖、葡 萄 糖、蔗 糖 母 液 分 別 按 濃 度 梯 度 ( 0. 2、0. 4、0. 6、0. 8、1. 0、1. 2、1. 4、1. 6mg /mL) 進(jìn)行稀 釋。以 0. 45μm 孔 徑 的 微 孔 濾 膜 過(guò) 濾,吸 取 20μL 濾液用于高效液相色譜分析。
分別將 3 個(gè)不同品種的梨稱重,切成小塊,經(jīng)組 織搗碎機(jī) ( HGB2WTS3,Waring) 粉碎 5min,將粉碎 后的漿均勻倒入玻璃皿成 2mm 左右的薄層,稱重, 置于冰箱 ( Simens,博西華家用電器公司) 冷 凍 層 -20℃冷凍 1h,再經(jīng)過(guò)真空冷凍干燥機(jī) ( FDU-2100, 日本東京理化株式會(huì)社) 干燥 24h,快速放置于玻璃 干燥器中,依次快速稱重,快速用研缽磨碎用保鮮膜 封存于玻璃干燥器中備用。
分別將 3 種不同品種的梨采用上述 1. 4. 1 操作冷 凍 1h 后不進(jìn)行冷凍干燥,直接在 105℃的烘箱中過(guò)夜 烘干,之后快速置于干燥器中,待冷卻至室溫,稱 重。
快速稱取上述樣品粉末 0. 10g 于 50mL 容量瓶中, 加入適量乙腈: 水 ( 1: 1) 混合溶液,在超聲波清洗 機(jī)中 ( 舒美 KQ-300VDE,昆山超聲儀器公司) 70℃, 45KHz 超聲提取 0. 5h,冷卻至室溫后,再補(bǔ)充乙腈: 水 ( 1: 1) 定 容 至 刻 度 線,并搖勻。以 0. 45μm 孔徑的微孔濾膜過(guò)濾,所得濾液用于高效液相色譜分 析。平行試驗(yàn) 3 次。
真空冷凍干燥技術(shù)能夠有效的除去水分,且經(jīng)該 技術(shù)處理的樣品營(yíng)養(yǎng)成分損失少。所以,本研究采 用真空冷凍干燥法對(duì)樣品進(jìn)行處理。經(jīng)真空冷凍干燥后的黃金梨、黃冠梨、雪花梨失 去的水分占總質(zhì)量的比值,分別達(dá) 83. 66%、87. 77% 和 87. 66%。經(jīng) 105℃過(guò)夜烘干后的樣品黃金梨、黃冠梨、雪花梨失去的總水分占總質(zhì)量,分別達(dá) 84. 66%、 89. 01%和 89. 68%。梨中主要糖分果糖、葡萄糖、蔗糖都易溶于水, 升高溫度可以提高糖的溶解度。使用超聲提取法用乙 腈: 水 ( 1: 1) 溶液浸提樣品中糖分,可以使糖分子 充分浸出,防止梨中糖分未完全浸出而帶來(lái)的誤差。 所以本實(shí)驗(yàn)采用浸提溫度為 70℃,超聲時(shí)間 0. 5h 。分別將果糖、葡萄糖、蔗糖對(duì)照品配制成濃度為 0. 08、0. 08、0. 04mg /mL 的溶液,以 0. 45μm 孔徑的 微孔濾膜過(guò)濾,吸取適量濾液用于高效液相色譜分 析,按上述 1. 5 色譜條件測(cè)定峰面積,外標(biāo)法定量計(jì) 算果糖、葡萄糖、蔗糖濃度的相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差 ( RSD, n = 6) ,相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差 ( RSD) 均小于 2. 7%。
對(duì) 3 個(gè)不同品種梨利用組織搗碎機(jī)磨成果漿,然 后采用真空冷凍干燥技術(shù)預(yù)處理,乙腈: 水 ( 1: 1) 超聲波 提 取 果 糖、葡 萄 糖 和 蔗 糖,再 利 用 HPLC - ELSD 法進(jìn)行定量分析,結(jié)合 SPSS 統(tǒng)計(jì)分析軟件,通 過(guò)差異性可以準(zhǔn)確的分析出梨中可溶性糖的組分 ( 主 要為葡萄糖、果糖和蔗糖) 、含量和不同品種梨中同 種糖的差異性比較。本實(shí)驗(yàn)采用的方法可用于梨中糖含量的質(zhì)量分析與控制,具有實(shí)用價(jià)值。
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