60Co-γ 射線輻照滅菌因其操作方便、滅菌效率 高、且具有常溫常壓、穿透力強的特點，多用于中 藥材原生粉或原生粉直接制成片劑或膠囊劑滅 菌。肚液散為廈門大學(xué)附屬第一醫(yī)院院內(nèi)制 劑，是廈門已故名醫(yī)周慕卿祖?zhèn)髅胤剑?由 甘 草、懷山 藥、麥 芽、雞 內(nèi) 金、灰香散等藥味組 成，用于治療消化不良、食欲不振、腸鳴腹瀉，療效顯著。

1 儀器與材料

1. 1 儀器

Waters UPLC 超高效液相色譜儀 ( 包 括 QSM 二元溶劑管理器、PDA 二極管陣列檢測 器、SM-FTN、樣品管理器、CH-A 型柱溫箱，美國 Waters 公 司) ; 數(shù) 控 超 聲 波 清 洗 器 KQ-100DE 型 ( 昆山舒美超聲儀器公司) ; GTＲ16-2 高 速 離 心 機 ( 北京時代北利離心機有限公司) ; 分析天平 ( 丹佛儀器北京有限公司) 。

1. 2 材料

甘草苷 ( 批號 111610-201106，含有量 93. 1%) 、甘 草 酸 銨 ( 批 號 111610201106110731- 201418，含有量 93. 1%) 均購于中國食品藥品檢 定研 究 院; 異 甘 草 素 ( 批 號 30518，含 有 量 ≥ 94%) 購于上海阿拉丁生化科技股份有限公司; 甘 草藥材 ( 批號 171024) 購于鷺燕醫(yī)藥公司 ( 內(nèi)蒙 古) ; 麥芽藥材 ( 批號 171002) 購于鷺燕醫(yī)藥公司 ( 浙江) ; 山藥藥材 ( 批號 170913) 購于鷺燕醫(yī)藥 公司 ( 河南) ; 灰香散 ( 批號 M171004) 自制中間 品; 色譜級乙腈、甲醇 ( 德國 Merck 公司) ; 磷酸 ( 上海化學(xué)試劑總廠) 。 13 批未 接 受 輻 射 肚 液 散 成 品，批 號 分 別 為 170503、 170504、 170505、 170506、 170510、 170512、 170515、 171003、 171004、 171101、 171105、180401、180402，取批號為 180401 肚液 散，保存未輻射母樣，將樣品分成 2 份，分別為接 受60 Co-γ 射線輻射劑量為 4、8 kGy，每種劑量平行 4 份。

2 方法與結(jié)果

2. 1 指紋圖譜建立

2. 1. 1 色譜條件

ACQUITY UPLC BEH C18色譜 柱 ( 2. 1 mm×100 mm，1. 7 μm) ; 流動相乙腈-水 ( 含 0. 05% 磷酸) 梯度洗脫，程序見表 1; 柱溫 25 ℃ ; 體積流量 0. 18 mL /min; 檢測波長 237 nm; 進樣量 1 μL。

2. 1. 2 對照品溶液制備

分別精密稱取甘草苷、 甘草酸銨、異甘草素對照品適量，用 70%甲醇配 成質(zhì)量濃度分別為 1. 41、0. 954、0. 415 mg /mL 的 貯 備 液，精 密 量 取 適 量，制 成 0. 141、0. 477、 0. 041 5 mg /mL對照品溶液。甘草酸質(zhì)量 = 甘草酸 銨質(zhì)量/1. 020 7 。

2. 1. 3 供試品溶液制備

稱取肚液散粉末 2. 4 g， 精密 稱 定，置于具塞錐形瓶中，加 入 70% 甲 醇 20 mL，精密量取，超聲 30 min，放冷，用 70%甲 醇補足減失質(zhì)量，離心 ( 5 000 r/min) 5 min，取 上清液過 0. 22 μm 微孔濾膜，即得。

2. 1. 4 參照峰選擇

在肚液散指紋圖譜中，甘草 酸 ( 峰號 15) 分離度好，峰面積較大，故選作參 照峰。

2. 1. 5 精密度試驗

稱取肚液散 ( 批號 170515) 粉末 2. 4 g，精密稱定，按 “2. 1. 3”項下方法制 備供試品溶液，精密吸取 1 μL，在 “2. 1. 1”項色 譜條件下進樣 6 次，測得各共有峰相對保留時間和 相對峰面積，其相對保留時間 ＲSD＜0. 44%，相對 峰面積 ＲSD＜2. 05%，表明儀器精密度良好。

2. 1. 6 重復(fù)性試驗

取肚液散 ( 批號 170515) 粉 末 2. 4 g，精密稱定，平行 6 份，分別按 “2. 1. 3” 項下方法制備供試品溶液，精 密 吸 取 1 μL，在 “2. 1. 1”項色譜條件下進樣，測得各共有峰相對 保留時間和相對峰面積，其相對保留時間 ＲSD＜ 1. 58%，相對峰面積 ＲSD＜2. 61%，表明該方法重 復(fù)性良好。

3 討論

本研究先后分析了乙腈-水、甲 醇-0. 05% 磷 酸、乙腈-0. 05%磷酸、乙腈-乙酸乙酸銨緩對、乙 腈-0. 1%磷酸等多個流動相系統(tǒng)，最終確定乙腈0. 05%磷酸分離效果較好，峰信息量較大。同時， 根據(jù) DAD 全波長掃描結(jié)果，在 237 nm 波長下，特 征峰響應(yīng)較高，色譜圖基線噪音較低，反映的信息 量較大，確定 237 nm 為檢測波長。 22 個共有指紋峰多為未知成分，且對照品不 易獲得。但與單味藥材在相同液相條件下獲得的色 譜圖比較保留時間及紫外特征吸收光譜信息，初步 確定 22 個共有峰多來自甘草。肚液散由甘草、麥 芽、山藥、灰香散等組成，為建立更加完善的肚液 散質(zhì)量評價系統(tǒng)，下一步將補充肚液散氣相指紋圖 譜，從而獲得更加全面的組分信息，更好控制產(chǎn)品質(zhì)量。



 

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