昆山超聲儀器有限公司了解到目前對于蛋白提取的基本方法主要是堿溶酸沉法,然而傳統(tǒng)堿液提取法存在處理時間長,提取率等問題。近年來超聲波技術(shù)在天然物質(zhì)提取方面顯示出強大的優(yōu)越性。昆山超聲儀器有限公司在本文使用超聲波輔助堿溶法提取原料中的蛋白質(zhì),通過單因素試驗初步確定各影響因子,采用Plackett-Burman設(shè)計篩選出對蛋白提取率具有顯著性影響的因素,通過響應(yīng)面優(yōu)化試驗,最終得出蛋白提取的最佳工藝,為后期酶解制備蛋白胨提供可行性依據(jù)。
CP124C 型電子分析天平,奧豪斯儀器有限公司;FK-A 型組織搗碎機,江蘇金壇市金城國勝實驗儀器廠;FW-400A 型傾斜式高速萬能粉碎機,北京中興偉業(yè)儀器有限公司;JJ-1 型精密定時電動攪拌器,江蘇省金壇市榮華儀器制造有限公司;JY92-2D 型超聲波細胞粉碎機,寧波新芝生物科技股份有限公司;UV-2550 型紫外可見分光光度計,日本島津儀器有限公司;CR20B2 型高速冷凍離心機,日本 Hitachi 公司;K1100 型全自動凱氏定氮儀,海能儀器;FD-1C-50 型真空冷凍干燥機,北京博醫(yī)康實驗儀器有限公司;標準篩,紹興海特儀器有限公司。
昆山超聲儀器有限公司采用超聲波輔助堿法提取雞副產(chǎn)物-大豆粕混合蛋白中的蛋白的工藝。本試驗利用PlackettBurman設(shè)計篩選出影響蛋白提取率的顯著性因素為:堿液質(zhì)量濃度、超聲功率和提取溫度。利用響應(yīng)面分析對超聲波輔助堿法提取 CBSM 蛋白工藝進行優(yōu)化,以蛋白提取率為響應(yīng)值,確定最優(yōu)提取條件:原料干重比為3:1、CBSM粒度為80目、堿液質(zhì)量濃度為0.70g/100mL、液固比為15:1、超聲功率為365W、提取溫度為42℃、提取時間為2h、提取次數(shù)為2次。該條件下經(jīng)過3次平行試驗,所得蛋白提取率為54.63%。經(jīng)測定該蛋白在pH值為4.0時達到等電點,沉淀后所得提取蛋白含量為62.64%。