舒腦欣滴丸由川芎和當歸兩味藥材提取加工制 成，具有理氣活血、化瘀止痛的功效。臨床上常 用于治療血虛血淤引起的頭痛、頭暈、偏頭痛、視物 昏花、健忘及失眠等癥狀，療效較為顯著。而藁 本內酯是其主要活性成分之一，藥理研究表明，藁本 內酯具有保護腦神經、改善微循環、舒張血管、抑制 血管平滑肌細胞增殖、抗癌、抗微生物、解熱、鎮痛消 炎等藥理作用。目前，藁本內酯的含量測定方法 多采用高效液相色譜法，因藁本內酯為揮發油成 分，也有氣相色譜法測定。本次實驗建立了舒腦欣 滴丸藁本內酯的液相測定方法和氣相測定方法，比 較不同測定方法對舒腦欣滴丸中藁本內酯含量測定 結果的影響。

GC-2014C 氣相色譜儀( 日本島津儀器有限公 司) ; HV-3 靜音無油空壓機( 濟南浩偉實驗儀器有 限公司) ; 純水氫氣發生器( 濟南浩偉實驗儀器有限 公司) ; Waters e2695 型高效液相色譜儀( 美國 Waters 公 司) ; 2998 PDA Detector 紫 外 檢 測 器; KQ250DB 型數控超聲波清洗器( 昆山市超聲儀器有限 公司) ; 電子天平( 德國賽多利斯) 。

舒腦欣滴丸( 天津中新藥業集團股份有限公 司，批號: 676018) ; 藁本內酯標準品( 實驗室自制) ; 微孔濾膜( 孔徑 0. 45 μm) ; 甲醇( 色譜純，天津市凱 通化學試劑有限公司) ; 乙酸( 分析純，天津市凱通 化學試劑有限公司) ; 純凈水。

GC-2014C 氣相色譜儀，色譜柱: KB-624 毛細管柱( 30 m × 0. 32 mm × 1. 80 mm) ，檢 測器: 氫焰離子化檢測器( FID) ，進樣口溫度 220℃， 檢測器溫度 320℃，色譜柱溫度 220℃，載氣為氮氣， 進樣量為 1 μL。

精密稱量藁本內酯對 照品 5. 6 mg 于 25 mL 容量瓶中，加入甲醇定容至刻度，搖勻，制成濃度為 200 μg·mL － 1 的藁本內酯溶 液，避光冷保存。

取舒腦欣滴丸 5 粒，粉 碎，精密稱重，置具塞錐形瓶中，精密加入 70% 的甲 醇 10 mL，稱量，超聲處理 30 min，冷卻，再次稱定其 重量，用甲醇補足失重，0. 45 μm 微膜濾過，精密量 取其續濾液 1 mL 置于 10 mL 容量瓶中，加入 70% 甲醇稀釋至刻度，晃勻，即得。

分別取空白溶液、對照品 溶液、供試品溶液，按上述色譜條件進樣分析，記錄 色譜圖，見圖 1。從色譜圖中可以看出，對照品溶液 中藁本內酯的保留時間為 8. 6 min。供試品溶液主 峰的保留時間與對照品溶液的主峰保留時間一致， 與相鄰組分分離較好，無相互干擾。

2. 1. 5 線性關系考察

精密量取藁本內酯對照品 母液 0. 5、1. 0、1. 5、2. 0、2. 5 mL 置 10 ml 棕色容量 瓶中，用甲醇稀釋至刻度，晃勻，得一系列不同濃度 的藁本內酯對照品溶液，按“2. 1. 1”項下色譜條件 進樣 3 次，取平均值，以峰面積對濃度作線性回歸， 得回歸方程為: Y = 302. 7X + 392. 4，r = 0. 9993，結 果表明，藁本內酯在 10 ～ 50 μg·mL － 1 范圍內線性 關系良好。

取對照品溶液按 “2. 1. 1”項下色譜條件，進樣量為 1 μL，重復進樣 5 次，記錄色譜圖，以藁本內酯的峰面積計算藁本內酯 的 ＲSD 為 1. 74% ，表明該方法的精密度良好。 取供試品溶液分別于 0，2，4，6，8，10 h 按 “2. 1. 1”項下色譜條件進樣分析，以藁本內酯的峰 面積計算 ＲSD 為 0. 50% ，表明供試品溶液在 10 h 內穩定性良好。

取同一批號舒腦欣滴丸 5 份， 按照“2. 1. 3”項下方法制備供試品溶 液 5 份，按 “2. 1. 1”項下色譜條件進樣分析，計算藁本內酯的 峰面積 ＲSD 為 1. 86% ，表明重復性良好。

精密量取“2. 1. 3”項下 已知濃度的供試品溶液 6 份，各加入對照品適量，用 甲醇溶液稀釋至刻度，晃勻，按上述色譜條件進樣 1μL，每份進樣 3 次，以藁本內酯峰面積計算藁本內 酯的平均回收率為 101. 32% ，ＲSD 為 1. 29% 。

取 3 個不同批次的舒腦欣 滴丸樣品，按“2. 1. 3”項下方法制備供試品溶液，并 按照“2. 1. 1”項下色譜條件進行測定，計算舒腦欣 滴丸中藁本內酯平均含量為 876. 70 μg /丸。

Waters e2695 高效液相色譜儀， 2998 PDA Detector 紫外檢測器，Venusil MP C18 色 譜柱( 4. 6 mm × 250 mm，5 μm) ，流動相為甲醇0. 2% 冰醋酸水溶液( 75∶ 25) ，檢測波長為 325 nm 流速為 1. 0 mL /min，進樣量 10 μL，柱溫 30℃。

取制備的藁本內酯標準 品 2. 5 mg，置于 25 mL 容量瓶中，加甲醇溶解并定 容至刻度，搖勻后即制成濃度為 100 μg /mL 的標準 品貯備溶液，避光冷藏保存。

取“2. 1. 3”項下供試品 溶液即得。

分別取空白溶液、對照品 溶液、供試品溶液，按“2. 2. 1”項下色譜條件進樣 10 μL 測定。色譜圖如圖 2 所示，從圖中可以看出藁本 內酯在 9. 9 min 出峰，色譜峰峰型良好，且各組分之 間互不干擾測定。

2. 2. 5 線性關系考察

精密量取對照品溶液適量， 置 10 mL 棕色容量瓶中，用甲醇溶液稀釋至刻度，制 成 5、10、20、40、50 μg·mL － 1 的 5 個不同濃度，取系 列不同對照品溶液 10 μL 按“2. 2. 1”項下色譜條件 分別進樣，記錄色譜圖，以藁本內酯的峰面積對其濃 度進行 線 性 回 歸，得 回 歸 方 程 為: Y = 19525X + 55814( r = 0. 9997) ，表明藁本內酯標準品濃度在 5 ～ 50 μg·mL － 1 范圍內與峰面積線性關系良好。

取制備好的供試品 溶液 5 份，按“2. 2. 1”項下色譜條件進樣分析，記錄 峰面 積，并 計 算 ＲSD 值，結 果 藁 本 內 酯 ＲSD 為 1. 04% ，表明該方法精密度良好。 取“2. 2. 3”項下供試品溶液，分別于 0、2、4、8、 10 h 進樣測定，按上述色譜條件進樣 10 μL 測定，并 計算藁本內酯的 ＲSD 為 1. 25% ，表明樣品溶液在 10 h 內穩定。

取同一批次的舒腦欣滴丸藥 品 5 份，按“2． 2． 3”項下方法制備供試品溶液 5 份， 在“2. 2. 1”項下色譜條件下進樣 10 μL，記錄下峰面 積，并計算 ＲSD 值為 1. 53% ，表明該法重復性良好。

取已知含量的供試品溶 液 3 mL，6 份，置 10 mL 容量瓶中，分別加入對照品 50 μg，用甲醇稀釋至刻度，晃勻，按“2. 2. 1”項下色 譜條件進行測定，代入標準曲線計算藁本內酯含量， 算出平均回收率為 99. 7% ，ＲSD 為 0. 6% 。

按“2. 2. 3”項條件下制備供試 品溶液 3 份，每份各進樣 3 次，記錄色譜圖，求得舒 腦欣滴丸中藁本內酯的含量為 887. 16 μg /丸。 2. 3 F 檢驗 照上述供試品溶液制備方法制備舒腦欣滴丸樣 品溶液 5 份，各吸取 1 μL 按“2. 1. 1”項下色譜條件 測定，各吸取 10 μL 按“2. 2. 1”項下色譜條件測定， 統計各方法測定項下藁本內酯峰面積，計算含量，利 用 F 檢驗分析兩組數據之間的差異性，判斷其差異 有無統計學意義。 查閱可知 F = S12 /S22 ( S1 ＞ S2) ，用實驗測得的 兩種含量數據方差代入 F 檢驗公式中，計算方差 比: F = 2. 99。F ＜ F0. 05，4，4 = 6. 39，結果表明，兩組數據差異無統計學意義。

本次實驗建立了氣相色譜法測定舒腦欣滴丸中藁本內酯含量，對氣相色譜條件進行優化，考察了檢 測器溫度 250℃、280℃、320℃，色譜柱溫度 200℃、 210℃、220℃，結果發現溫度對蒿本內酯影響很大， 提高檢測器溫度和色譜柱溫度，藁本內酯峰與相鄰 組分分離較好，達到基線分離，而且出峰時間適中， 峰型良好; 隨著溫度的升高，色譜峰會有所提前，節 省了實驗時間，故檢測器溫度是 320℃，色譜柱溫度 220℃。同時也建立了高效液相色譜法測定藁本內 酯含 量，查閱文獻進行了流動相優化，考 察 了 0. 1% 、0. 2% 、1% 冰醋酸溶液，同時也對流動相的比 例進行了調整，適當的提高了有機相比例，使其出峰 快速，節省實驗時間，并且根據分離效果、峰形效果， 最終選擇甲醇︰ 0. 2% 冰醋酸水溶液( 75 ︰ 25) 。 利用 F 檢驗對兩種方法測定的含量結果進行 了檢驗，其結果并無顯著性差異，表明兩種方法均可 作為舒腦欣滴丸中藁本內酯含量測定的方法，均能準確地測定出其含量，但液相在實際操作過程中較 之氣相分析時間稍長。