在人體新陳代謝過程中會產量大量的自由基， 它們具有強氧化性，會造成人體內生物膜及細胞功 能的傷害，進而加大心血管疾病及癌癥發生的風 險，同時還會加快人體衰老的進程。有研究發現， 抗氧化劑具有明顯清除自由基的能力，能夠減少其 對人體的危害。近些年，隨著人們安全意識的逐 漸增強，開發綠色高效的天然抗氧化劑已成為研究 的熱點。玉米須是玉米的花柱和柱頭，資源豐富， 含有多種功能性成分，具有降血壓、降血脂、抗氧 化、抗腫瘤等功能，其中，玉米須中含有的多酚和 黃酮類物質發揮著一定的功效。

本試驗以玉米須為原料，采用超聲輔助浸提 法，研究不同提取溶劑對玉米須提取物的含量及其抗氧化活性的影響，旨在選出超聲輔助提取的最佳 溶劑，進一步為天然無毒抗氧化劑的開發提供理論 基礎，同時對玉米副產物的綜合開發利用具有一定 的實踐參考價值。

供試玉米須采集于綏化市田間，將其干燥、粉 碎、過 0.59 mm 篩，備用。 沒食子酸標準品 （天津市光復精細化工研究 所）；蘆丁標準品（上海源葉生物科技有限公司）；福 林酚試劑 （國藥集團化學試劑有限公司）；1，1- 二 苯基 -2- 苦基肼 （DPPH）（分析純）（美國 Sigma 公司）；2，2- 聯氮 - 雙 -（3- 乙基苯并噻唑 -6- 磺酸） （ABTS）（湖南匯百特生物科技有限公司）；亞硝酸 鈉、硝酸鋁、氫氧化鈉、碳酸鈉、三氯乙酸、氯化鐵、 硫酸亞鐵等均為國產分析純。

TU-1901 雙光束紫外可見分光光度計（北京普析通用儀器有限責任公司）；KQ-200VDE 雙頻數控 超聲波清洗器 （昆山市超聲儀器有限公司）；80-2B 臺式離心機（湖南星科科學儀器有限公司）；HH-6 數 顯恒溫水浴鍋（江蘇省金壇市榮華儀器制造有限公 司）；RE-52A 旋轉蒸發器（上海亞榮生化儀器廠）。

稱取玉米須 3 g，按料液比 1∶ 15（g/mL）分別加入蒸餾水、甲醇、70%甲醇、50%甲 醇、乙醇、70%乙醇和 50%乙醇的溶劑混勻后進行超 聲輔助提取，設定超聲溫度 60 ℃，超聲時間 40 min； 超聲提取結束后，3 500 r/min 離心 10 min，濾渣按 上述方法再進一步提取，合并 2 次濾液，旋轉蒸發 濃縮，濾液定容到 50 mL 容量瓶中，低溫保存，備用。

采用福林酚比色法測 定總多酚含量。以沒食子酸為標準品，在最大吸收 波長 760 nm 處測定不同濃度標準品的吸光度，制 作標準曲線，得到回歸方程 y＝5.195 4x－0.168 （R2 ＝0.992 1）。取 5 mL 不同溶劑的提取物，依標準 曲線的方法測定不同溶劑提取物的吸光值，計算各 提取溶劑提取物中多酚的含量，結果以各提取物中 含有相當沒食子酸的毫克數表示（mg/g）。

采用硝酸鋁比色法測 定總黃酮含量。以蘆丁作為標準品，在 510 nm 處 測定不同濃度標準品的吸光度，繪制標準曲線，得 到回歸方程 y＝4.571 4x＋0.047 2（R2 ＝0.995 6）。取 5 mL 不同溶劑提取物，依標準曲線的方法測定不 同溶劑提取物的吸光值，計算其黃酮含量，結果以 各提取物中含有相當蘆丁的毫克數表示（mg/g）。

還原能力的測定采用 吸光值法；參照 MA 等的方法測定 1，1- 二苯 基 -2- 苦肼基自由基（DPPH·）的清除能力；參照 XIANG 等的方法測定超氧自由基（O2 ·）的清除能 力；參照 CHEN 等的方法測定羥自由基（·OH）的 清除能力；參照 LI 等的方法測定 2，2- 聯氮 - 二 （3- 乙基 - 苯并噻唑 -6- 磺酸）二銨鹽（ABTS+ ·）自 由基的清除能力。 1.4 數據處理 每個試驗都重復 3 次，計算結果以均值±標準·1140·差表示，采用 Excel 2010 作圖，差異顯著性分析采 用 Statistix 8.0 軟件，相關性分析采用 SPSS 軟件進行。

由表 1 可知，不同溶劑提取物中總黃酮和總多 酚的含量存在一定的差異。總黃酮含量在不同溶劑 提取液中約為 0.25～0.65 mg/g，其中，70%乙醇中的 總黃酮含量最高；其次為蒸餾水，但其與 70%乙醇 間差異不顯著（P＞0.05）；含量最低的為 50%甲醇 提取劑，總黃酮含量為（0.25±0.02）mg/g。玉米須不 同溶劑提取物中總多酚含量為 0.41～0.79 mg/g，其 中，以 70%乙醇為溶劑時提取物中的總多酚含量較 高，而以甲醇為溶劑的提取物中的總多酚含量最 低。綜合分析可知，提取玉米須的總黃酮和總多酚 適于采用 70%的乙醇作為提取溶劑。華艷宏等研 究也發現，藜麥種子中的總黃酮和總多酚利用 70% 的乙醇作為提取溶劑時，提取量較高。

2.2 不同溶劑提取物抗氧化活性分析

2.2.1 不同溶劑提取物的還原能力分析

還原能 力和抗氧化能力成正比關系，即還原能力越強抗氧 化能力越強，因此，還原能力大小能夠表征不同 溶劑提取物的抗氧化活性大小。有研究報道，具有 抗氧化性的物質能將鐵氰化鉀還原，得到的還原產 物再與三氯化鐵反應生成有色物質，在 700 nm 處 有最大吸光度，吸光度越大，說明生成的有色物質 越多，即還原能力越強。不同溶 劑提取物中的總黃酮和總多酚對鐵均具有一定的 還原能力，但存在一定的差異，其中，以 70%甲醇作 為提取劑時還原能力最高，但與 70%乙醇間差異不 顯著（P＞0.05）；蒸餾水提取物的還原能力最弱；甲 醇與乙醇提取物的還原能力顯著高于蒸餾水 （P＜ 0.05），但二者間差異不顯著（P＞0.05）。

DPPH 自由基是一種很穩定的以氮為中心的自由基，清除方法操作簡便，常作為抗氧化能力的 評價指標。DPPH 自由基清除率越高，抗氧化能力 越強。不同溶劑提取物在一定程度上 均可以清除 DPPH 自由基，提取溶劑為 70%乙醇 時，清除能力顯著高于其他溶劑（P＜0.05）；70%甲 醇提取物的清除能力次之；50%甲醇、乙醇以及蒸 餾水作為溶劑時的提取物，其清除率集中在 61%～ 65%，差異不顯著（P＞0.05）；甲醇作為提取溶劑時， 表現出的清除能力最弱。

本研究表明，不同溶劑玉米須提取物中的總多 酚和總黃酮含量不同，而且本研究采用還原力、 DPPH 自由基、超氧自由基、羥基自由基以及 ABTS 自由基清除率對不同溶劑提取物的抗氧化能力進 行了比較，結果發現，采用 70%乙醇作為溶劑得到 的提取物抗氧化能力最強，其次為 70%甲醇提取 物。提取物中的總多酚和總黃酮含量與抗氧化能力 之間的相關性分析表明，總多酚與抗氧化能力之間 相關性顯著，而總黃酮與抗氧化能力之間的相關性 較差。同時，5 種抗氧化評價指標之間的相關性表 明，不同抗氧化體系之間并不都呈正相關。這可能 是由于不同溶劑提取物中起抗氧化作用物質的結 構和性質不同，以及由 5 種抗氧化評價指標的反 應機制不同所致。結果證實，70%乙醇玉米須提取 物具有較高的抗氧化能力，該研究結果為超聲輔助 提取溶劑的選擇提供了理論基礎，同時為抗氧化功 能食品等領域的開發應用及抗氧化機制的研究奠 定了理論參考