1 儀器與試藥
DZL 型煎藥壺,潮州市潮安區康爾順貿易有限公司;N-10000 型旋轉蒸發儀、FDU-2100 型冷凍干 燥機,EYELA 公司;Milli-Q 型去離子水機,美國 Millipore 公司;JA2103N 型千分之一天平,上海新 橋衡器科學儀器有限公司;FA124 型萬分之一天平, 天津億諾科學儀器有限公司;SHZ-D(III)型循環 式水式真空泵,河南省予華儀器有限公司;昆山舒美KQ-400B型高功率數控超聲波清洗器,昆山市超聲儀器有限 公司;FW100 型萬能粉碎機,天津市泰斯特儀器有 限公司;TDGC2-3KVA 型接觸式調壓器,飄峰電氣 有限公司;Agilent 1260-VWD 型高效液相色譜儀, 可變波長掃描檢測器,美國 Agilent 公司。
2 方法與結果
取綠原酸、苦杏仁苷、 梔子苷、橙皮苷、黃芩苷、漢黃芩苷、甘草酸銨、 五味子醇甲對照品適量,精密稱定,加甲醇溶液配 制成含綠原酸 122.55 μg/mL、苦杏仁苷 561.15 μg/mL、梔子苷 134.30 μg/mL、橙皮苷 120.73 μg/mL、 黃芩苷 585.37 μg/mL、漢黃芩苷 297.08 μg/mL、甘 草酸銨 832.40 μg/mL、五味子醇甲 48.96 μg/mL 的 混合對照品溶液。將處方藥材黃芩、 桔梗、茯苓、陳皮、貝母、桑白皮、當歸、天門冬、 山梔、苦杏仁、麥門冬、五味子、甘草共 13 味藥材 用中藥粉碎機粉碎后,過一號篩。取黃芩粉 4.5 g, 桔梗粉、茯苓粉、陳皮粉、貝母粉、桑白皮粉各 3.0 g,當歸粉、天門冬粉、山梔粉、杏仁粉、麥門冬粉 各 2.1 g,五味子粉、甘草粉各 0.9 g,生姜 2.5 g, 大棗 3.0 g,于煎藥壺中以蒸餾水或去離子水 350 mL 浸泡 50 min,以 210 V 電壓加熱至水沸騰,調整電 壓至 150 V 保持沸騰約 25 min,傾倒出湯劑;再加 入水 350 mL,以 210 V 電壓加熱至水沸騰,調整電壓至 150 V 保持沸騰約 18 min,傾倒出湯劑與第 1 次倒出的湯劑混合,湯劑體積為 350 mL。
3 討論
實驗中對流動相的種類(甲醇-純水、甲醇-加 酸水、乙腈-純水、乙腈-加酸水)和酸度的比例(乙 腈-0.05%磷酸水溶液、乙腈-0.1%磷酸水溶液、乙腈0.2%磷酸水溶液、乙腈-0.2%甲酸水溶液),以及色 譜柱柱溫(30、35、40 ℃),洗脫體積流量(0.5、 0.6、0.8、1.0 mL/min)等進行了優化,以整體峰形 和分離度為指標進行評價,優選以 0.1%磷酸水溶液乙腈為流動相,梯度洗脫,柱溫 35 ℃,體積流量 0.6 mL/min 為清肺湯色譜檢測條件。
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