靈芝為多孔菌科真菌赤芝 (Ganoderma lucidum Karst),或紫芝(Ganoderma sinense)的干燥子實體。外 形呈傘狀,菌蓋腎形、半圓形或近圓形,為多孔菌科真 菌靈芝的子實體。具有補氣安神、止咳平喘的功效,用 于治療眩暈不眠、心悸氣短、虛勞咳喘。主要分布于浙 江、黑龍江、吉林、安徽、江西、湖南、貴州、廣東、福建等 地。靈芝具有雙向調節人體機能的作用,能過雙向 調節人體機能平衡,使人的免疫系統得到快速的提 升,恢復人體的內臟和細胞達到正常化。
1 材料與儀器
1.1 主要材料
靈芝孢子油:廣東現代漢方科技有限公司。 齊墩果酸對照品:中國食品檢定研究院;冰醋酸、 香草醛、高氯酸、無水乙醇等(分析純):廣州化學試 劑廠。
1.2 主要儀器
UV-2450 紫外可見分光光度計:日本島津公司; HWS24 型電熱恒溫水浴鍋、DHG-9425A 型電熱鼓風 干燥箱:上海一恒科學儀器有限公司;昆山舒美KQ-500DE超聲波清洗機:Fisher Scientific 飛世爾實驗器材 (上海)有 限公司。
2 試驗方法
2.1 試樣液制備
準確稱取靈芝孢子油樣品 0.1 g 于 100 mL 容量 瓶中,加入無水乙醇 80 mL,超聲提取 1 h。冷卻至室 溫 20 ℃后,用無水乙醇定容至刻度線,搖勻,作為供 試液。
2.2 標準儲備液的制備
稱取 10 mg 齊墩果酸對照品,置 100 mL 容量瓶中, 用無水乙醇溶解并稀釋至刻度,搖勻,制成約 0.1 mg/mL 的齊墩果酸對照品儲備液。
2.3 測定波長的選擇
取配置好的標準溶液 0.6 mL 于 10 mL 比色管中, 水浴蒸干,加入 0.2 mL 5 %香草醛-冰乙酸溶液和 0.8 mL 高氯酸輕輕振蕩,于 70 ℃水浴加熱 15 min,取 出冷卻加入 5 mL 乙酸后,在可見光區進行掃描,確定 最大吸收波長 540 nm。齊墩果酸標準溶液的吸收曲線 掃描見圖 1。
3 10批不同廠家靈芝孢子油樣品測定
分別購買 10 批不同廠家的靈芝孢子油,分別準確 稱取 0.10 g 樣品于 10 0 mL 容量瓶中,加入無水乙醇 80 mL,超聲提取 1 h。冷卻至室溫 20 ℃后,用無水乙醇 定容至刻度線,搖勻,作為供試液。取 0.2 mL 供試液于 具塞比色管,置于干燥箱內,90 ℃烘干溶劑。分別加入 0.2 mL 5 %香草醛-冰乙酸溶液和 0.8 mL 高氯酸,輕輕 振蕩,于 70 ℃水浴加熱 15 min,取出,立即置冰水冷卻 5 min。用 5 mL 移液管準確移取冰乙酸 5.0 mL 稀釋,搖 勻,在 30 min 內用紫外分光光度計在 540 nm 處測其 吸光度 A。通過線性回歸方程計算得到供試液中總三 萜的含量見表 10。
從表 10 中可以看出市售的 10 種靈芝孢子油都能 滿足其標示值,其中產品 2 和產品 6 的總三萜實測值 最高,達到 34.2 %,產品 4 的實測值最低,為 23.7 %。
4 結論
以香草醛乙酸溶液及高氯酸為顯色劑,并通過水 浴加熱的條件,采用分光光度法是測定總三萜的常用 方法,但其水浴時間、溫度、顯色劑用量和高氯酸用量 都會影響所測總三萜含量。通過單因素逐步分析,總 結出在加入 0.2 mL 5 %香草醛-冰乙酸溶液和 0.8 mL 高氯酸,于 70 ℃水浴加熱 15 min 的條件下,測試靈芝 孢子油中總三萜的含量能夠達到精密度好,準確度 高,對樣品空白影響較小,且方法有很好的回收率,能 夠為不同靈芝孢子油中總三萜含量的對比提供較好 的參考方法。
免責聲明:文章僅供學習和交流,如涉及作品版權問題需要我方刪除,請聯系我們,我們會在第一時間進行處理。